折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟注意事項：
1．基礎程序；
2．擴增溫度和延伸溫度；
3．反應時間；
4．循環(huán)次數(shù)；
5．PCR 反應液的配制；
6．PCR技術的基本原理；
7．PCR的反應動力學；
8．PCR擴增產物；
9．PCR反應體系與反應條件。
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以下是折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟的詳細說明書：
產品名稱 | 折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Marteilia refringensPCR |
編號 | EY00P796 |
使用方法：
注：折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。
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乳酸桿菌選擇性肉湯250g用于軟酸桿菌增菌培養(yǎng)
DTM培養(yǎng)基 DTM Medium 用于食品中真菌的培養(yǎng)
血瓊脂基礎培養(yǎng)基 Blood Agar Base 250克 供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用
支原體肉湯培養(yǎng)基250g/瓶含酚紅，不含，用于支原體的培養(yǎng)(中國藥典)incubationmedia支原體肉湯培養(yǎng)基250g/瓶含酚紅，不含，用于支原體的培養(yǎng)(中國藥典)
MediumI(foeSeedandBasalLayer)
TTCAgarBase
BrucellaAgar
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 250 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)(SN、GB標準)
緩沖李斯特氏菌增菌肉湯基礎250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌，每225ml培養(yǎng)基中添加incubationmedia緩沖李斯特氏菌增菌肉湯基礎250g/瓶用于李斯特氏菌的選擇性增菌，每225ml培養(yǎng)基中添加1415
無菌病毒運輸液(VTM) 3ml/支*36 用于甲流病毒標本運送
抗生素檢定培養(yǎng)基6號250g用于粘菌素等的效價測定
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g) incubation media 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g)
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 250g 供霉菌和酵母菌計數(shù)及分離培養(yǎng)
三號膽鹽于抑制革蘭氏陽性菌的生長incubationmedia三號膽鹽于抑制革蘭氏陽性菌的生長
SC瓊脂基礎 250g 用于產氣莢膜梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)，需天極D-環(huán)和50%卵黃乳液(ISO標準)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0077Eca-109(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2
Wish細胞，人羊膜細胞系 人T細胞淋巴瘤,Hat-78細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2
BGC823(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細胞裂解液 (陽性對照)
EMT-6 小鼠癌
CL-0358HKC(人胚腎上皮細胞)5×106cells/瓶×2
人結腸平滑肌細胞(HCSMC)(5×105 )
人胰腺癌細胞;AsPC-1 大鼠皮膚肥大細胞*培養(yǎng)基 100mL
人肺轉化細胞;AE1201
MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟GHS1 金黃地鼠皮膚成纖維細胞
GPH4 豚鼠心肌來源細胞
GPL1 豚鼠肺成纖維樣細胞
GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細胞
需要自備的器材：
1．折光馬爾太蟲PCR試劑盒步驟儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
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